高致病性禽流感疫情处置技术规范（试行）
农业部
农业部文件
农政发[2004]1号
--------------------------------------------------------------------------------
各省、自治区、直辖市农业、农垦、畜牧、渔业、乡镇企业、农机化厅（局、委），新疆生产建设兵团农业局：
《高致病性禽流感疫情处置技术规范（试行）》已经2004年2月2日农业部第7次常务会议审议通过，现印发你们，请遵照执行。
二○○四年二月三日
高致病性禽流感疫情处置技术规范（试行）
第一项 样品采集、保存及运输技术规范
采集、保存和运输样品应当符合下列要求，并填写采样单。
一、样品采集
（一）病禽
1．至少从5只濒死禽采集样品。样品包括：泄殖腔拭子和气管拭子（置于缓冲液中）各5个（小珍禽可采集新鲜粪便）；气管和肺的混样5个，肠管及内容物的混样5个；肝、脾、肾和脑等组织样品（不能混样）各5个。
2．分别采集至少10个病鸡的血样（急性发病期血清）。
（二）病死禽
无发病禽时，可从死亡不久的病禽采样，采样要求同病禽。
棉拭子单独放入容器，容器中盛放含有抗菌素的pH值为7.0-7.4的 PBS液。抗生素的选择视当地情况而定，组织和气管拭子悬液中加入青霉素（2000IU/mL）、链霉素（2mg/mL）、庆大霉素（50μg/mL）、制霉菌素（10000 IU/mL）。但粪便和泄殖腔拭子所用的抗生素浓度应提高5倍。加入抗生素后pH值应调至7.0-7.4。
二、样品保存和运输
血样要单独存放，不能混合。
样品应密封于塑料袋或瓶中，置于有制冷剂的容器中运输，容器必须密封，防止渗漏。
样品若能在24小时内送到实验室，冷藏运输。否则，应冷冻运输。
若样品暂时不用，则应冷冻（最好-70℃或以下）保存。
采样单
样品名称
样品编号
采样基数
采样数量
采样日期
保存情况
冷冻（藏）
被采样单位
通讯地址
联系电话
邮编
被采样单位盖章或签名
年 月 日
采样单位盖章 采样人签名
年 月 日
备注：
此单一式三份，第一联存根，第二联随样品，第三联由被采样单位保存
第二项 血清学诊断技术规范
一. 血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验技术
(一)材料准备
1. 96孔V型微量反应板，微量移液器（配有滴头）。
2. 阿氏（Alsevers）液、鸡红细胞悬液，配制方法见附录A。
3. pH7.2的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）。
4. 高致病性禽流感病毒血凝素分型抗原和标准分型血清以及阴性血清。
(二) 操作方法
1. 血凝（HA）试验（微量法）
（1） 在微量反应板的1-12孔均加入0.025mL PBS，换滴头。
（2） 吸取0.025mL抗原加入第l孔，混匀。
（3） 从第1孔吸取0.025mL抗原加入第2孔，混匀后吸取0.025mL加入第3孔，如此进行对倍稀释至第11孔，从第11孔吸取0.025mL弃之，换滴头。
（4） 每孔再加入0.025mL PBS。
（5） 每孔均加入0.025mL 1%（V/V）鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）。
（6） 振荡混匀，在室温（20℃-25℃）下静置40min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下1hr）。对照孔红细胞将成明显的钮扣状沉到孔底。
（7） 结果判定。将板倾斜，观察红细胞有无呈泪滴状流淌。完全血凝（不流淌）的抗原或病毒最高稀释倍数代表一个血凝单位（HAU）。
2. 血凝抑制（HI）试验（微量法）
（1） 根据血凝试验结果配制4HAU的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4HAU的抗原的稀释倍数。例如，如果血凝的终点滴度为1:256，则4HAU抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）。
（2） 在微量反应板的1-11孔加入0.025mL PBS，第12孔加入0.05mL PBS。
（3） 吸取0.025mL血清加入第1孔内，充分混匀后吸0.025mL于第2孔，依次对倍稀释至第10孔，从第10孔吸取0.025mL弃去。
（4） 1-11孔均加入含4HAU混匀的病毒抗原液0.025mL，室温（约20℃）静置至少30min。
（5） 每孔加入0.025mL的鸡红细胞悬液轻轻混匀，静置约40min（室温约20℃，若环境温度太高可置4℃条件下1hr），对照红细胞将呈显钮扣状沉于孔底。
（三）结果判定
以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。
只有阴性对照孔血清滴度不大于21og 2，阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。HI价小于或等于31og2判定HI试验阴性；HI价等于41og 2为阳性。
二. 琼脂凝胶免疫扩散（AGID）试验
(一) 材料准备
1. 硫柳汞溶液、pH7.2的0.01mol/L PBS溶液，配制方法见附录B。
2. 琼脂板：制备方法见附录C。
3. 禽流感琼脂凝胶免疫扩散抗原、标准阴性和阳性血清。
（二） 操作方法
1. 打孔。在制备的琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔），孔径约5mm，孔距2mm-5mm，将孔中的琼脂用8号针头斜面向上从右侧边缘插入，轻轻向左侧方向将琼脂挑出，勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。
2. 封底。用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂刚刚要溶化为止，封闭孔的底部，以防侧漏。
3. 加样。用微量移液器或带有6～7号针头的0.25mL注射器，吸取抗原悬液滴入中间孔(图1的⑦号)，标准阳性血清分别加入外周的①和④孔中，被检血清按编号顺序分别加入另外4个外周孔（图1的②，③，⑤，⑥号孔）。每孔均以加满不溢出为度，每加一个样品应换一个滴头。
4. 作用。加样完毕后，静置5min～10min，然后将平皿轻轻倒置放入湿盒内，37℃温箱中作用，分别在24h、48h和72h观察并记录结果。
（三） 结果判定
1. 判定方法。将琼脂板置日光灯或侧强光下观察，若标准阳性血清(图1的①和④号孔)与抗原孔之间出现一条清晰的白色沉淀线，则试验成立。
2. 判定标准
(1) 若被检血清孔（如图1中的②号）与中心抗原孔之间出现清晰致密的沉淀线，且该线与抗原与标准阳性血清之间沉淀线的末端相吻合，则被检血清判为阳性。
(2) 被检血清孔（如图1中的③号）与中心孔之间虽不出现沉淀线，但标准阳性血清孔（如图1中的④号）的沉淀线一端向被检血清孔内侧弯曲，则此孔的被检样品判为弱阳性（凡弱阳性者应重复试验，仍为弱阳性者，判为阳性）。
(3) 若被检血清孔（如图1中的⑤号）与中心孔之间不出现沉淀线，且标准阳性血清沉淀线直向被检血清孔，则被检血清判为阴性。
(4) 被检血清孔（如图1中的⑥号）与中心抗原孔之间沉淀线粗而混浊或标准阳性血清与抗原孔之间的沉淀线交叉并直伸，被检血清孔为非特异反应，应重做，若仍出现非特异反应则判为阴性。
①
⑥ ②
⑦
⑤ ③
④
图1 AGP试验结果
附 录 A
HA和HI试验用溶液的配制
1．阿氏（Alsevers）液配制
葡萄糖 2.05g
柠檬酸钠 0.8g
柠檬酸 0.055g
氯化钠 0.42g
加蒸馏水至100mL，加热溶解后调pH值至6.1，69kPa 15min高压灭菌，4℃保存备用。
2．1%鸡红细胞悬液制备
采集至少3只SPF公鸡或无禽流感和新城疫等抗体的健康公鸡的血液与等体积阿氏液混合，用pH7.2的0.01mol/L PBS液洗涤3次，每次均以1000r/min离心10min，洗涤后用PBS配成1%（V/V）红细胞悬液，4℃保存备用。
附 录 B
AGP试验用溶液的配制
1．1%硫柳汞溶液的配制
硫柳汞 1.0g
加蒸馏水至 100mL
溶解后，置100mL瓶中盖塞存放备用。
2． pH7.2的0.01mol/L PBS 的配制
（1）配制25×PB：称量2.74g磷酸氢二钠和0.79g二水磷酸二氢钠加蒸馏水至100mL。
（2）配制1×PBS：量取40mL25×PB，加入8.5g 氯化钠，加蒸馏水至1000mL。
（3）用氢氧化钠或盐酸调pH至7.2。
（4）灭菌或过滤。
（5）PBS一经使用，于4℃保存不超过3周。
附 录 C
琼 脂 板 的 制 备
称量琼脂糖1.0g，加入100mL的pH7.2的0.01mol/L PBS液，在水浴中煮沸使之充分融化，加入8g氯化钠，充分溶解后加入1%硫柳汞溶液1mL，冷至45℃-50℃时，将洁净干热灭菌直径为90mm的平皿置于平台上，每个平皿加入18mL-20mL，加盖待凝固后，把平皿倒置以防水分蒸发，放普通冰箱中保存备用（时间不超过2周）。
第三项 高致病性禽流感诊断标准
一、诊断指标
（一） 临床诊断指标
1．急性发病死亡；
2．脚鳞出血；
3．鸡冠出血或发绀、头部水肿；
4．肌肉和其他组织器官广泛性严重出血。
（二） 血清学诊断指标
1．H5或H7的血凝抑制(HI)效价达到24及以上；
2. 禽流感琼脂免疫扩散（AGP）试验阳性(水禽除外)。
（三） 病原学诊断指标
1．H5或H7亚型病毒分离阳性；
2．H5或H7 特异性分子生物学诊断阳性；
3. 任何亚型病毒静脉内接种致病指数（IVPI）大于1.2。
二、结果判定
（一） 临床怀疑为高致病性禽流感
符合临床诊断指标1，且至少有临床诊断指标2、3、4之一。
（二） 疑似高致病性禽流感
符合结果判定（一），且符合血清学诊断指标1或/和2。
（三） 确诊
符合结果判定（二），且至少符合病原学诊断指标1、2、3之一。
第四项 封锁技术规范
一、由所在地畜牧兽医行政管理部门划定疫点、疫区、受威胁区。
二、封锁令的发布：畜牧兽医行政管理部门报请本级人民政府对疫区实行封锁，人民政府在接到报告后，应立即做出决定。决定实行封锁的，发布封锁令。
三、封锁的实施：当地人民政府组织对疫区实施封锁。在疫区周围设置警示标志，在出入疫区的交通路口建立临时性检疫消毒站，指派专人，配备消毒设备，禁止易感染活禽进出和易感染禽类产品运出，对出入人员和车辆进行严格消毒。
四、封锁令的解除：疫区内所有禽类及其产品按规定处理后，经过21天以上的监测未出现新的传染源，且受威胁区病原检测阴性，经动物防疫监督人员审验合格后，由当地畜牧兽医行政管理部门向发布封锁令的人民政府申请解除封锁。
第五项 扑杀技术规范
扑杀活禽可采取如下方法：
一、窒息
先将待扑杀禽装入袋中，置入密封车或其它密封容器，通入二氧化碳窒息致死；或将禽装入密封袋中，通入二氧化碳窒息致死。
二、扭颈
扑杀量较小时采用。根据禽只大小，一只手握住头部，另一只手握住体部，朝相反方向扭转拉伸。
三、其它
也可根据本地情况，采用其它能避免病原扩散的致死方法。
第六项 无害化处理技术规范
所有病死禽、被扑杀禽及其产品、排泄物以及被污染或可能被污染的垫料、饲料和其他物品应当进行无害化处理。
无害化处理可以选择深埋、焚化、焚烧等方法，饲料、粪便也可以发酵处理。
一、深埋
1．深埋点应远离居民区、水源和交通要道，避开公众视野，清楚标示。
2．坑的覆盖土层厚度应大于1.5米，坑底铺垫生石灰，覆盖土以前再撒一层生石灰。坑的位置和类型应有利于防洪。
3．禽鸟尸体置于坑中后，浇油焚烧，然后用土覆盖，与周围持平。填土不要太实，以免尸腐产气造成气泡冒出和液体渗漏。
4．饲料、污染物等置于坑中，喷洒消毒剂后掩埋。
二、焚化、焚烧
1．疫区附近有大型焚尸炉的，可采用焚化的方法。
2．处理的尸体和污染物量小的，可以挖1.5米深的坑，浇油焚烧。
三、发酵
饲料、粪便可在指定地点堆积，密封发酵。
以上处理应符合环保要求，所涉及到的运输、装卸等环节要避免洒漏，运输装卸工具要彻底消毒。
第七项 疫区清洗消毒技术规范
一、成立清洗消毒队
清洗消毒队应有一名专业技术人员指导。
二、设备和必需品
（一）清洗工具：扫帚、叉子、铲子、锹和冲洗用水管。
（二）消毒工具：喷雾器、火焰喷射枪、消毒车辆、消毒容器等。
（三）消毒剂：醛类、氧化剂类、氯制剂类、双季胺盐类等合适的消毒剂。
（四）防护装备：防护服、口罩、胶靴、手套、护目镜等。
三、养禽场清理、清洗和消毒
（一）首先清理污物、粪便、饲料、垫料等。
（二）对地面和各种用具等彻底冲洗，并用水洗刷禽舍、车辆等，对所产生的污水进行无害化处理。
（三）养禽场的金属设施设备的消毒，可采取火焰、薰蒸等方式消毒。
（四）养禽场圈舍、场地、车辆等,可采用消毒液喷洒的方式消毒。
（五）养禽场的饲料、垫料等作深埋、发酵或焚烧处理。
（六）粪便等污物作深埋、堆积密封发酵或焚烧处理。
（七）疫点内办公区、饲养人员的宿舍、公共食堂、道路等场所，要喷洒消毒。
（八）污水沟可投放生石灰或漂白粉。
四、交通工具清洗消毒
（一）出入疫点、疫区的交通要道设立临时性消毒点，对出入人员、运输工具及有关物品进行消毒。
（二）疫区内所有可能被污染的运载工具应严格消毒，车辆的外面、内部及所有角落和缝隙都要用清水冲洗，用消毒剂消毒，不留死角。
（三）车辆上的物品也要做好消毒。
（四）从车辆上清理下来的垃圾和粪便要作无害化处理。
五、家禽市场和笼具的清洗消毒
（一）用消毒剂喷洒所有区域。
（二）饲料和粪便等要深埋、发酵或焚烧。
（三）刮擦和清洗笼具等所有物品，并彻底消毒。所产生的污水要作无害化处理。
六、屠宰加工、贮藏等场所的清洗消毒
（一）所有家禽及其产品都要深埋或焚烧。
（二）禽舍、笼具、过道和舍外区域要清洗，并用消毒剂喷洒。
（三）所有设备、桌子、冰箱、地板、墙壁等要冲洗干净，用消毒剂喷洒消毒。
（四）所用衣物用消毒剂浸泡后清洗干净，其他物品都要用适当的方式进行消毒。
（五）以上所产生的污水要作无害化处理。
第八项 散养户养殖场地和禽舍消毒技术要求
一、扑杀鸡鸭等禽鸟后，场地必须清洗消毒。
二、在清洗消毒之前要穿戴好防护衣物。
三、禽舍中的粪便应彻底清除，院子里散落的禽粪应当收集，并作堆积密封发酵或焚烧处理。
四、清理堆积禽粪时应淋水，不得扬起粪尘。
五、用消毒剂彻底消毒场地和禽舍，用过的个人防护物品如手套、塑料袋和口罩等应销毁。
六、可重复使用的物品须用去污剂清洗两次，确保干净。
七、将扑杀时穿过的衣服用70℃以上的热水浸泡5分钟以上，再用肥皂水洗涤，在太阳下晾晒。
八、处理污物后要洗手、洗澡。
第九项 扑杀禽鸟工作人员防护技术要求
一、穿戴合适的防护衣物
（一）穿防护服，或者穿长袖手术衣再加一件防水围裙。
（二）戴可消毒的橡胶手套。
（三）戴N95口罩或标准手术用口罩。
（四）戴护目镜。
（五）穿可消毒的胶靴，或者一次性的鞋套。
二、洗手和消毒
（一）密切接触感染禽鸟的人员，要用肥皂洗手。
不分页显示 总共2页 1 [2]
下一页
湖北省人民代表大会常务委员会关于修改部分地方性法规中行政强制规定的决定
湖北省人大常委会
湖北省人民代表大会常务委员会关于修改部分地方性法规中行政强制规定的决定
（2011年12月1日湖北省第十一届人民代表大会常务委员会第二十七次会议通过）
为了贯彻实施《中华人民共和国行政强制法》，维护法制统一，湖北省第十一届人民代表大会常务委员会第二十七次会议决定，对本省下列地方性法规中有关行政强制的规定作出修改：
一、《湖北省反不正当竞争条例》
将第二十一条修改为：“监督检查部门在监督检查不正当竞争行为时，可以依法检查与不正当竞争行为有关的财物，必要时可以责令被检查的经营者说明该商品的来源和数量，暂停销售，听候检查，不得转移、隐匿、销毁该财物。”
将第三十一条修改为：“违反本条例第二十一条规定的，监督检查部门可处以被转移、隐匿、销毁财物价款一倍以上三倍以下的罚款。”
二、《湖北省统计管理条例》
删去第二十一条第一款中的“逾期不缴的，从期满之日起按银行利息加收滞纳金”。
三、《湖北省盐业管理条例》
删去第三十二条中的“承运人拒绝接受处罚的，盐业行政主管机构可以采取中止其车辆运行的措施”。
将第三十三条第一款中的“查封或者扣押”修改为“先行登记保存”；将该条第二款修改为“对隐藏、转移、变卖、毁损已被先行登记保存的物品的，由盐业行政主管机构处以该物品价值一倍以上三倍以下的罚款”，并与该条第一款合并为一款。
四、《湖北省计量监督管理条例》
将第二十六条第一款中的“封存有关计量器具和登记保存”修改为“先行登记保存”。
将第二十七条中的“封存的有关计量器具和登记保存的其他物品”修改为“先行登记保存的物品”。
删去第二十八条中的“封存计量器具”。
将第三十条中的“逾期不改的，停止使用、封存计量器具，并处以一千元以下罚款”修改为“逾期不改的，处以一千元以下罚款”。
五、《湖北省无线电管理条例》
将第二十三条中的“依法强制拆除其设备”修改为“申请人民法院强制拆除”。
六、《湖北省高速公路管理条例》
将第四十四条中的“由省高速公路管理机构从其通行费中直接抵付或者申请人民法院强制执行”修改为“由省高速公路管理机构申请人民法院强制执行”。
将第四十八条修改为：“违反本条例，未按规定开通或者擅自关闭服务区，影响高速公路运营管理的，由省高速公路管理机构责令限期改正；逾期不改正的，处1万元以上5万元以下的罚款；仍不改正的，由省高速公路管理机构指定其他专业机构代为开通，有关费用由高速公路经营管理者承担。”
七、《湖北省道路运输条例》
将第三十八条第一款修改为：“未取得道路运输经营许可擅自从事出租汽车客运经营的，县级以上运管机构可以暂扣车辆，并妥善保管，不得使用，不得收取或者变相收取保管费用。除因不可抗力外，造成车辆及随车物品遗失、损坏的，应当依法赔偿。当事人应当在15日内到运管机构接受处理，违法行为改正后，运管机构应当立即放行。”将该条第二款修改为：“道路运输经营车辆未按照规定进行机动车综合性能检测，或者其驾驶人员不符合规定条件的，县级以上运管机构可以责令停止车辆运行，限期予以改正。”
删去第四十七条第二项。
八、《湖北省水路交通管理条例》
将第十六条第二款中的“强制清除”修改为“予以清除”。
将第四十条中的“可扣留或者吊销船舶证书和船员证件”修改为“可暂扣或者吊销船舶证书和船员证件”。
删去第四十一条中的“逾期不补缴的，可以扣留船舶证书和船员证件；对抗缴水路交通规费的，可以采取强制措施滞留船舶，其费用由船舶所有人承担。滞留船舶满三十日以上，船主既不接受处理，又不申诉的，县级以上交通主管部门可将滞留船舶依法拍卖，拍卖所得冲抵应缴费款、滞纳金和滞留船舶费用后，其余额返还船主。”
九、《湖北省实施〈中华人民共和国烟草专卖法〉办法》
删去第十九条第二款中的“扣留”；将该条第三款中的“可以扣留与案件有关的烟草专卖品”修改为“对与案件有关的烟草专卖品，可以先行登记保存”。
十、《湖北省木材流通管理条例》
删去第十八条中的“对违反本条例规定收购、销售、经营、加工、运输的木材，可以扣留。”
删去第十九条第四款中的“必要时报公安机关批准扣留其运输工具”。
将第二十条第一款修改为：“木材检查站扣留木材，应发给当事人扣留凭证，并书面通知货主或承运人在规定期限内依法接受处理”；删去该条第二款。
删去第二十六条第四项中的“及其运输工具”。
十一、《湖北省森林采伐管理办法》
将第二十四条第二项中的“封存”修改为“登记”。
十二、《湖北省城市市容和环境卫生管理条例》
将第四十二条第五项中的“依法强制拆除”修改为“申请人民法院强制拆除”。
十三、《湖北省城乡规划条例》
将第四十条第一款中的“未自行拆除的，由审批部门组织拆除，所需费用由临时建设方承担”修改为“未自行拆除的，由所在地城市、县人民政府城乡规划主管部门责令限期拆除”。
十四、《湖北省实施〈中华人民共和国集会游行示威法〉办法》
删去第二十二条第一款中的“参加”；将该条第二款修改为：“违反前款规定的，公安机关有权予以拘留或者强行遣回原地。”
十五、《湖北省专利保护条例》
将第二十二条第一款修改为：“专利管理机关处理专利纠纷时，根据认定专利侵权行为的需要，可以查阅、复制与案件有关的档案、图纸、资料、账册等原始凭证，有关单位或者个人应协助调查并提供有关证据材料，不得拒绝。”
删去第二十三条。
将第二十八条第一款第二项修改为：“对涉嫌违法行为的产品或者场所进行检查，对有证据证明是冒充专利的产品进行查封或者扣押”，将第四项修改为“查阅、复制与冒充专利行为有关的合同、账册、标记等资料”。
十六、《湖北省实施〈中华人民共和国道路交通安全法〉办法》
将第六十四条第二款修改为：“对进入高速公路的行人除处罚外，应当责令其迅速离去。”
将第六十五条第二款修改为：“对驾驶非机动车进入高速公路的，应当责令其迅速离去；拒绝接受罚款处罚的，可扣留非机动车。”
以上法规经修改后，条款序号作相应调整。
本决定自2012年1月1日起施行。
